致敏試驗
致敏試驗
具有致敏作用的化學物經一定途徑進入機體，與組織蛋白結合形成完全抗原，刺激免疫活性細胞產生致敏淋巴細胞或體液抗體；經1~2周致敏期，使體內免疫反應得到充分發展，形成一定數量的致敏淋巴細胞或特異抗體。當再次接觸（激發）時使機體對該化學物產生感受性增高的狀態，以一定的異常形式表現
致敏試驗與刺激試驗的區別
刺激試驗是一個局部的炎癥反應，而致敏是全身免疫系統的反應，屬于細胞免疫應答
應用范圍舉例：
常用測試方法
Common test methods
豚鼠最大劑量法（GPMT） | |
封閉式貼敷法（Buehler 試驗） |
局部淋巴結試驗法（LLNA） |
其中豚鼠最大劑量法（GPMT）和封閉式貼敷法（Buehler試驗）是最常用的、生物安全性評價中使用率最高的兩種方法。
豚鼠最大劑量試驗是最敏感的方法，歐洲國家使用此方法較廣泛；
封閉式貼敷試驗適用于局部產品，美國常用此方法。
局部淋巴結試驗（LLNA）被經濟與合作發展組織接受作為當前豚鼠試驗的唯一替代方法，該法對動物保護方面也有所改善，也被認可用于化學物致敏活性的檢測。
測試標準
testing standard
常見測試標準：
醫療器械生物學評價 第10部分：刺激與遲發型超敏反應試驗 ISO 10993-10:2010 | |
醫療器械生物學評價 第10部分:刺激與皮膚致敏試驗 GB/T 16886.10-2017 |
測試步驟
Test Step
致敏試驗-豚鼠最大劑量法（GPMT）
試驗原理：單一化學物采用豚鼠最大劑量試驗，對材料在試驗條件下使豚鼠產生皮膚致敏反應的潛能做出評定。
1
準備動物
2
預試驗
預試驗目的：為了確定主試驗中所用試驗樣品的濃度。
確定主試驗中所用實驗樣品的濃度
為主試驗的局部誘導階段所選擇的最高濃度應僅導致輕度紅斑，不產生其他有害作用
為主試驗的激發階段選擇的最高濃度應不使動物產生紅斑
3
主試驗
3.1 動物分組
每種試驗樣品應至少使用10只動物，對照組至少使用5只動物。
10只試驗動物和5只對照動物如全部呈陰性反應，則再進行試驗也未必會出現陽性反應。
但是，如出現任何疑似反應時，應進行再激發，如仍有疑似反應，則要重新進行試驗，最少采用20只試驗動物和10只對照動物。
3.2 皮內誘導階段->局部誘導階段->激發階段
按下圖所示（A、B和C），在每只動物去毛的肩胛骨內側部位成對皮內注射0.1mL
結果評價
Evaluation of the results
結果評價
對照組動物評分小于1，試驗組評分≥1時，提示為致敏
對照組動物評分≥1，實驗組反應超過對照組中最嚴重的反應，認為致敏
如試驗組動物出現反應的動物數多于對照組動物，但反應強度并不超過對照組，可能需要在首次激發后1周~2周進行再次激發，以明確反應